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人关节软骨细胞培养法的改良及其特有表型的检测

The modified chondrocyte culture method and inspection of cell' s phenotype

摘要目的探讨简便、易行的人关节软骨细胞体外培养方法.方法以0.25%胰酶消化软骨块0.5 h,0.30%胶原酶消化4 h后,将软骨细胞与小片软骨(0.2mm3大小)共同置入预涂多聚赖氨酸的培养瓶中培养;与传统方法对照,用倒置显微镜、免疫组织化学、电镜、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,检测经7次传代后软骨细胞表型改变相伴随的形态学及分子生物学特征.结果改良法培养的细胞活性率可达100%.经多次传代的软骨细胞仍保持原代软骨细胞的表型特征,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性,并可观察到软骨的特有的细胞-胶原纤维几何构像.而传统法培养的软骨细胞在第7代特有表型出现改变.结论本改良法是一种较方便而且有效的培养法.

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作者 宋卫东 [1] 刘尚礼 [1] 李卫平 [1] 沈慧勇 [1] 黄东生 [1] 黄建荣 [1] 学术成果认领
作者单位 510120,广州,中山大学附属第二医院骨科 [1]
栏目名称
DOI 10.3760/j.issn:1001-9030.2003.02.022
发布时间 2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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中华实验外科杂志

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