换一批中国人Uroplakin Ⅱ基因的克隆及其真核表达载体构建
Cloning of Chinese Uropakin Ⅱ gene and construction of its eukaryotic expression vector
摘要目的克隆中国人UroplakinⅡ基因并构建其真核表达载体.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从1例GⅢ/T3N0M0膀胱移行上皮癌(TCC)标本中扩增UroplakinⅡ全长cDNA后进行核酸序列分析,并构建其真核表达载体;重组子瞬时转染UroplakinⅡ基因缺陷型TCC EJ细胞株72 h后,RT-PCR法检测癌细胞UroplakinⅡ表达水平.结果成功克隆了中国人UroplakinⅡ全长cDNA(555 bp),与国外报道的序列同源性高达100%.真核表达载体pcDNA-UPⅡ转染EJ细胞后,癌细胞UroplakinⅡmRNA水平显著增高(P＜0.01).结论从中国人TCC组织中克隆出UroplakinⅡ基因,为深入研究UroplakinⅡ基因在TCC生物学行为中的作用及其靶向生物治疗策略奠定了基础.
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