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重组人pEGFP-heNOS质粒的构建及其在人内皮祖细胞中的表达

Construction of recombinant pEGFP-heNOS plasmid and its expression in EPC

摘要目的 构建含有增强绿色荧光蛋白报道基因(EGFP)的人内皮一氧化氮合酶(heNOS)重组质粒,观察其在人骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)中的表达.方法 构建重组人pEGFP-heNOS质粒,脂质体转染人骨髓来源的内皮祖细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测heNOS在内皮祖细胞中的表达.结果 重组人pEGFP-heNOS质粒构建成功,体外转染入人内皮祖细胞中,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测到heNOS的表达.结论 重组人pEGFP-heNOS质粒体外转染入内皮祖细胞后,目的基因能够在细胞中有效表达,为下一步基因治疗提供了理论支持.

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