换一批人圆锥角膜组织中白细胞抗原相关酪氨酸磷酸酶表达的研究
Study on enhanced leukocyte antigen-related tyrosine phosphatase in keratoconus
摘要目的探讨白细胞抗原相关酪氨酸磷酸酶(LAR)在人圆锥角膜组织中的表达及其临床意义.方法收集2001年12月至2002年3月于北京同仁眼科中心行角膜移植手术的患者术中取下的角膜片,分离15例人圆锥角膜、7例正常角膜、6例大泡性角膜病变、3例无新生血管性角膜白斑和2例角膜营养不良标本的总RNA,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析.收集2002年7月至12月于北京同仁眼科中心行角膜移植手术的患者术中取下的角膜片,提取6例圆锥角膜、3例正常角膜、3例大泡性角膜病变、3例无新生血管性角膜白斑和2例角膜营养不良样本总蛋白,进行Western印迹法,用增强的化学发光法显迹.对LAR的RNA和蛋白的显迹条带分别采用相对定量RT-PCR和Western印迹法分析.结果使用等量总RNA进行RT-PCR后,圆锥角膜样本LAR扩增产物检测到强信号条带,正常和其他角膜疾病样本只检测到弱信号或检测不到信号.圆锥角膜的LAR扩增产物测序发现其mRNA有外显子13的删除.使用等量总蛋白进行Western印迹法分析,用LAR抗体检测发现:圆锥角膜样本有清晰的信号条带,正常和其他角膜疾病样本仅有弱信号或检测不到信号.结论 LAR的mRNA和蛋白表达量在圆锥角膜中明显增强,而在正常角膜、大泡性角膜病变、无新生血管性角膜白斑和角膜营养不良中表达很弱,甚至检测不到.LAR在圆锥角膜中的增强表达可能与圆锥角膜的发生有重要关系.圆锥角膜中LAR外显子13的删除可能与其自身功能有关.
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DOI
10.3760/j:issn:0412-4081.2005.03.010
发布时间
2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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