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幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因克隆表达及临床应用

Cloning and expression of urease B subunit (UreB) of Helicobacter pylori

摘要目的获得重组表达的人幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位蛋白(UreB), 并将其运用于Hp感染的临床检测.方法应用聚合酶链反应(PCR)技术从临床分离的Hp菌株基因组中扩增出编码UreB的基因(ureB),将其克隆于质粒PinPointTMXa-Ⅲ上进行序列分析和蛋白表达,通过亲和层析得到纯化的重组UreB蛋白并用于113例消化性溃疡患者Hp感染的酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测.结果克隆的ureB基因核苷酸序列与GenBank公布的序列相比较,同源性为96.44%,推定氨基酸序列同源性为99.65%.纯化的重组UreB蛋白相对分子量约为66 000,纯度为90%以上,并保持较好的免疫原性.应用纯化的重组UreB蛋白联合ELISA法检测113例消化性溃疡患者Hp感染的灵敏度和特异性分别为92.0%、98.5%.结论重组UreB蛋白作为抗原用于ELISA法检测Hp感染,保持了较高的灵敏度和特异性, 可用于Hp感染的临床检测与诊断、疗效判定及流行病学研究.

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DOI 10.3760/j:issn:1009-9158.2001.05.013
发布时间 2004-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家科技攻关项目((96-901-01-54))
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中华检验医学杂志

中华检验医学杂志

2001年24卷5期

296-298页

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