特异性小干扰性RNA降低骨桥蛋白基因表达对肝癌细胞侵袭性的影响
Knocking down osteopontin expression by specific siRNA reduces the in vitro invasiveness of human hepatocellular carcinoma cells
目的 应用RNA干扰技术降低细胞内骨桥蛋白的表达水平,研究骨桥蛋白对人肝癌细胞侵袭性的影响.方法 体外化学合成骨桥蛋白序列特异性双链RNA,转染高转移肝癌细胞株HCC-LM3,用实时定量PCR和Western blot检测骨桥蛋白的表达.通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验,观察肝癌细胞恶性生物学行为的改变.结果 骨桥蛋白特异性小干扰性RNA(siRNA)转染组的HCC-LM3细胞,骨桥蛋白mRNA水平下降79%,蛋白水平下降81%.体外实验表明,与空白对照组及非特异性siRNA转染组相比,骨桥蛋白特异性siRNA转染组HCC-LM3细胞克隆形成数目下降,穿过人工基底膜的细胞数减少(P<0.05).结论 降低骨桥蛋白的表达可显著抑制肝癌细胞的侵袭转移能力.
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