摘要目的 克隆中期因子(mid kine,MK)的编码序列,构建MK-EGFP融合表达质粒,诱导表达并亲合纯化.方法 用RT-PCR技术从人胚胎组织中获得MK编码基因,构建原核表达质粒pET-MK-EGFP;转化大肠杆菌,诱导表达重组蛋白;纯化回收后鉴定生物活性.结果重组质粒经酶切测序与预期相符,融合蛋白表达后的指示荧光于激光共聚焦显微镜下清晰可见,MK在其中保持了原有的完整构象和生物活性.结论 MK-EGFP重组质粒构建正确,融合蛋白大量表达,并具有完整的生物学活性.
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