肝素酶siRNA抑制胰腺癌侵袭性的实验研究
Experimental study on the invasion inhibiting effect of Hpa smallinterfering RNA (siRNA)on pancreatic cancer cells
摘要目的 观察肝素酶(hparinase,Hpa)小干扰RNA(small-interfering RNA,siRNA)对胰腺癌侵袭力的影响.方法 设计3条Hpa干扰靶序列:Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA,稀释退火后分别与线性化pGenesil-1.1质粒表达载体的连接制成pGenesil1.1/Hpa1-siRNA、pGenesil1.1/Hpa2-siRNA、pGenesil1.1/Hpa3-siRNA重组质粒.然后将上述目的基因转染SW1990胰腺癌细胞,并设空白对照和阴性对照组.RT-PCR检测Hpa-mRNA表达,Western blot检测Hpa蛋白表达.Transwell小室检测SW1990细胞体外侵袭力.结果 Hpa-mRNA和Hpa蛋白在基因转染前后的表达,NC和HK组无明显差别,Hpa1-siRNA,Hpa2-siRNA,Hpa3-siRNA三组均明显下降,Hpa2-siRNA抑制效率优于Hpa1-siRNA和Hpa3-siRNA(P<0.05).Hpa2-siRNA明显抑制SW1990胰腺癌细胞侵袭力,抑制率均达42.6%.结论 Hpa2-siRNA是Hpa特异性干扰序列,对SW1990胰腺癌细胞侵袭力具有明显抑制作用.
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