1α，25-二羟维生素D3对体外培养的成骨细胞分化及矿化成熟影响

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摘要目的：探讨1α，25-二羟维生素D3（1α，25-（OH）2D3）对体外培育SD大鼠成骨细胞（OB）增殖、分化和成熟矿化的影响。方法采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24h新生SD乳鼠颅盖骨分离得到的OB，设置0nmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L的1α，25-（OH）2D3为空白对照、低、中、高干预组，干预24h、48h和72h后分别采用噻唑蓝（MTT）比色法检测OB增殖率、PNPP法测定碱性磷酸酶（ALP）活性、放射免疫法检测骨钙素（OC）含量、RT-PCR检测BMP-2 mRNA表达；3d和6d后测定钙盐沉积量；10d和20d后茜素红染色法检测细胞钙化结节数。结果与空白组比较，在干预24h、48h、72h后低干预组成骨细胞A值分别增加20.50%、38.77%、18.22%，高干预组ALP分别增加（3.068±1.137）%、（0.505±0.156）%、（1.115±0.382）%，OC含量分别增加（0.285±0.097）%、（0.469±0.134）%、（0.734±0.225）%；高干预组成骨细胞钙沉积量在干预3d和6d后分别增加（0.968±0.236）%和（0.929±0.307）%，成骨细胞矿化结节在干预10 d和20d后，分别增加（13.889±3.973）%和（10.472±0.263）%，均呈正相关（P<0.05）。结论在本实验浓度范围内，中、高剂量1α，25-（OH）2D3可促进体外成骨细胞分化和矿化，刺激成骨细胞分泌骨钙素，发挥着促进骨形成的作用。