换一批
换一批摘要目的 分离、培养、鉴定小型猪牙周膜干细胞(PDLSCs)并使用不同浓度的维甲酸(RA)对其进行成骨方向诱导,观察各浓度RA诱导后小型猪PDLSCs的碱性磷酸酶活性、相关成骨基因表达的差异.方法 采用组织块法获得小型猪PDLCs,有限稀释法纯化小型猪PDLSCs,免疫荧光法检测STRO-1、免疫细胞化学法检测波形蛋白、角蛋白鉴定小型猪PDLSCs.分别使用0.5 μm、1 μm、2 μm RA对小型猪PDLSCs进行成骨诱导,14 d后行ALP染色,诱导21 d后,茜素红染色检测矿化结节.诱导14 d后对比各组细胞ALP活性.Real-time PCR定量分析各组RA诱导小型猪PDLSCs第21天ALP、OPN、OCN、Col I基因表达情况.结果 纯化后小型猪PDLSCs STRO-1,波形蛋白阳性表达,角蛋白阴性表达,各组RA诱导14 d后,ALP染色阳性,诱导21 d后各诱导组细胞茜素红染色阳性.ALP活性检测显示,小型猪PDLSCs诱导至第14天,ALP活性随RA浓度增高而增高(P＜0.001).Real-time PCR分析成骨相关基因表达结果显示,ALP、OCN基因表达与RA浓度呈剂量依赖关系.结论 0.5 μm、1 μm、2 μm三种浓度的RA均可诱导小型猪PDLSCs分化为成骨样细胞,并且其成骨诱导的能力在一定范围内随着RA浓度增高而增强,可以认为RA可能是一种更优秀的成骨诱导剂.
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关键词
维甲酸牙周膜干细胞小型猪成骨诱导Retinoic acidPeriodontal ligament stem cellsMiniature swineOsteogenic differentiation
栏目名称
论著
发布时间
2023-11-27
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