tBHQ对草酸钙引起的肾小管上皮细胞氧化应激损伤的影响

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摘要目的分析叔丁基对苯二酚(tBHQ)对草酸钙引起的肾小管上皮细胞氧化应激损伤的影响,并探讨其与核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)通路的相关性.方法采用正常大鼠肾上皮样细胞系NRK-52E构建细胞模型,将细胞分为对照组、tBHQ组、草酸钙(CaOx)组、CaOx+tBHQ组4组.tBHQ组用tBHQ预处理6 h;CaOx组在含4 mmol/L CaOx的完全培养基中培养;CaOx+tBHQ组用tBHQ组预处理6 h,保持在含4 mmol/L CaOx的完全培养基中继续培养.24 h后使用光学显微镜观察NRK-52E细胞的形态及草酸钙晶体沉积情况,收集细胞及上清液,采用MTT、FCM检测细胞凋亡,采用相应试剂盒测定血清活性氧类物质(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,采用免疫印迹法(WB)检测细胞中Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白的表达情况.结果 CaOx组可见草酸钙晶体沉积,CaOx+tBHQ组仅有少量晶体沉积,其余两组无晶体沉积现象;与对照组相比,CaOx组细胞凋亡增加,ROS、MDA含量上升,SOD水平降低,Nrf2、HO-1、NQO-1表达下调;与CaOx组相比,CaOx+tBHQ组细胞凋亡减少,细胞内ROS、MDA含量降低,SOD水平升高,Nrf2、HO-1、NQO-1的表达上调.结论 tBHQ能够保护草酸钙晶体导致的肾小管上皮细胞氧化应激损伤,是通过Nrf2/HO-1信号通路发挥其作用.