摘要目的 探讨抗微小核糖核酸-21(microRNA-21,miR-21)治疗对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型小鼠肾脏损伤的作用.方法 8 周龄C57BL/6 小鼠随机分为对照组、DN组、DN+miR-21 反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)组(DN+miR-21-ASO组)、DN+miR-21反义寡核苷酸错配碱基对(MM-ASO)组(DN+miR-21-MM-ASO组).通过腹腔注射链脲佐菌素构建DN小鼠模型.全自动生化分析仪检测小鼠 24h尿蛋白(urine protein,Upro)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)含量.PAS染色观察小鼠肾脏糖原沉积,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肾脏病理学变化,TUNEL染色观察小鼠肾脏组织细胞凋亡情况.实时定量PCR检测小鼠肾脏组织miR-21的相对表达水平.蛋白质印迹(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2 基因(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)和活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cas-pase-3)蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,DN组小鼠肾脏组织miR-21 表达显著上调[(3.23±0.24)比(1.00±0.11),P<0.01],24 h Upro、Scr和BUN[(53.87±5.87)mg比(13.83±1.80)mg、(89.35±3.34)μmol/L比(28.27±2.91)μmol/L、(25.79±2.15)mmol/L比(7.36±0.50)mmol/L,P<0.01]水平均显著增高;与DN+miR-21-MM-ASO组比较,DN+miR-21-ASO组小鼠肾脏组织miR-21的表达受到抑制[(0.77±0.11)比(3.52±0.27),P<0.01],小鼠 24 h Upro、Scr和BUN[(29.92±6.06)mg比(50.69±6.93)mg、(68.39±3.75)μmol/L比(87.84±6.63)μmol/L、(17.66±1.04)mmol/L比(23.80±3.16)mmol/L,P<0.01]水平明显降低.PAS染色显示,与对照组比较,DN组小鼠肾脏组织系膜和基底膜区PAS染色阳性物质增多,颜色深;与DN+miR-21-MM-ASO比较,DN+miR-21-ASO组小鼠肾脏组织系膜和基底膜区PAS染色阳性物质明显减少且红染区域较少.HE染色表明,与对照组比较,DN组小鼠出现肾小球体积增大和肾小管刷状缘脱离等肾脏损伤表现;与DN+miR-21-MM-ASO组比较,DN+miR-21-ASO组小鼠肾脏损伤显著改善.TUNEL染色表明,与对照组比较,DN组小鼠肾脏组织细胞凋亡显著增加;与DN+miR-21-MM-ASO组比较,DN+miR-21-ASO组小鼠肾脏组织细胞凋亡显著降低.Western blot检测显示,与对照组比较,DN组Bax和cleaved caspase-3 表达上调[(3.24±0.26)比(1.00±0.10)、(2.82±0.16)比(1.00±0.13),P<0.01],Bcl-2 表达下调[(1.06±0.12)比(4.16±0.41),P<0.01];与DN+miR-21-MM-ASO组比较,DN-miR-21-ASO组Bax和cleaved caspase-3 表达下调[(2.04±0.19)比(3.20±0.07)、(1.54±0.11)比(3.10±0.13),P<0.01],Bcl-2 表达上调[(2.05±0.14)比(1.02±0.09),P<0.01].结论 抗miR-21治疗可以明显改善DN模型小鼠的肾脏损伤.