肝癌细胞系中Oct4与Wnt/β-catenin和TGF-β信号通路的相互影响
Modulation of Oct4 to Wnt/β-catenin and TGF-β Signal Ways in HCC Cell Line
摘要目的 探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用.方法 应用RT-PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、Wntlob、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中的表达;使用siRNA沉默人肝癌HepG2细胞Oct4和TCF3的表达,实时荧光定量RT-PCR法检测Wntlob、β-catenin、TCF3及ELF、Smad3和Smad4等基因的表达变化.结果 Oct4和β-catenin,Wntlob、TCF3及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达;siRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-ceatenin、Wnt10b随之下调达40%~50%左右,而TCF3表达升高到3倍左右;同时ELF、Smad3和Smad4均下降到原来的1%以下;而siRNA-TCF3沉默TCF3后,Oct4的表达也升高2~3倍;ELF升高亦达2~3倍,Smad3和Smad4也略有升高.结论 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TC乃及ELF、Smad3和Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达提示彼此之间有相互作用.RNAi实验证明Oct4对Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路的成员有调控作用;Oct4与TCF3之间的负反馈作用值得深入研究.
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