miR-640通过抑制SLIT1介导Wnt/β-catenin通路促进脑胶质瘤对替莫唑胺的耐药
miR-640 Promote Proliferation,Invasion and Resistance to Temo-zolomide in Glioma by Inhibiting SLIT 1-mediated Wnt/β-catenin Pathway
摘要[目的]评价miR-640介导Wnt/β-catenin通路对脑胶质瘤耐药细胞增殖、侵袭及替莫唑胺(temazolamide,TMZ)敏感性的影响.[方法]利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定脑胶质瘤细胞内 miR-640 的表达.U87/TMZ 细胞分为 NC inhibitor 组、miR-640 inhibitor 组和 miR-640 inhibitor+si-SLIT1组.用不同浓度(15、30、60、120、240、480和960μmol/L)TMZ处理细胞,检测细胞对TMZ的耐药性;运用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell实验检测U87/TMZ细胞增殖活力和侵袭力;用双荧光素酶报告基因实验验证miR-640与SLIT1的靶向关系.采用Western blot检测Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白表达水平.[结果]miR-640在脑胶质瘤细胞中高表达,转染后miR-640 inhibitor组的miR-640表达水平、侵袭细胞数目(57±23 vs 153±31)、IC50值(131.61±8.97 vs 293.33±11.28)、增殖率(18.48±4.23 vs 43.84±8.94)均比 NC inhibitor 组低(P<0.05).miR-640 靶向调控 SLIT1 的表达,miR-640 inhibitor+si-SLIT1 组 β-catenin、c-myc、Cyclin D1 蛋白表达水平均高于 miR-640 inhibitor 组(P<0.05).[结论]miR-640通过SLIT1介导Wnt/β-catenin通路促进脑胶质瘤增殖、侵袭及对替莫唑胺的耐药性.
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