换一批蓝细菌6803 agp基因的分子克隆和缺失突变株的构建
Molecular Cloning and Construction of agp Gene Deletion-mutant in Cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803
摘要PCR扩增了蓝细菌集胞藻6803（Synechocystis sp. PCC6803）的agp基因（编码ADP-葡萄糖焦磷酸羧化酶），进一步以pUC118为载体将其克隆到大肠杆菌中，构建了pUCA质粒。通过DNA体外重组，以红霉素抗性基因部分取代agp基因片段，构建了既含agp基因上游及下游序列、又携带选择性标记——红霉素抗性的pUCAE质粒。该质粒转化野生型集胞藻6803细胞，获得了能在含红霉素的培养基上正常生长的agp基因缺失突变株。对该突变株基因组DNA进行PCR扩增，验证了其基因结构的正确性。突变株细胞生长速度较野生型细胞快，胞内的叶绿素含量比野生型细胞高，表明该突变株具有较高的光合效率。在突变株中未检测到糖原的存在，进一步从生理水平上验证了突变株构建的正确性。
更多相关知识
DOI
10.3321/j.issn:1672-9072.2001.05.011
发布时间
2005-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（39870064）
国家重点基础研究发展计划（973计划）（G1998010100）
- 浏览117
- 被引5
- 下载1
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
