换一批
换一批应用噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5A-TP9启动子DNA的结合蛋白
Screening of Promoter DNA-Binding Protein of NS5A-TP9 Gene by Phage Display Technique from Human Liver cDNA Library
摘要：
目的:筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5A-TP9启动子DNA结合蛋白,探索NS5A-TP9的表达调节机制.方法:应用噬菌体展示技术,以聚合酶链反应(PCR)技术扩增的NS5A-TP9启动子DNA片段作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"富集过程,噬斑裂解液PCR扩增后,回收产物构建克隆载体,对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性生物信息学搜索.结果:噬菌体经富集后,筛选出10个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定了与HCV非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5A-TP9启动子DNA结合的蛋白有:补体C3、甲胎蛋白、人血清白蛋白、人核糖体蛋白20S和αl微球蛋白.结论:用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到HCV NS5A蛋白反式激活基因NS5A-TP9启动子DNA结合蛋白,分析了这些蛋白的功能,为研究NS5A-TP9基因的转录调节机制,进一步阐明HCV非结构蛋白NS5A的致病机制奠定了基础.
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作者：
作者单位：
中国人民解放军第273医院,新疆,库尔勒,841000
[1]
中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心
[2]
期刊：
《中西医结合肝病杂志》2003年13卷6期 363-365页
ISTIC
分类号：
R512
栏目名称：
基础理论研究
DOI：
10.3969/j.issn.1005-0264.2003.06.016
发布时间：
2005-11-03
基金项目：
国家自然科学基金
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