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禽流感免疫酶诊断技术及应用

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项目年度编号 0400760045
中图分类号 S858.343 S858.353 S859.799.9
成果公布年份 2001
成果简介 技术关键:禽流感ELISA重组核蛋白抗原和全病毒抗原制备及质量鉴定技术;酶标抗体制备及标定技术;各参数最适工作条件的标定技术;间接ELISA和斑点ELISA诊断试剂盒研制技术。主要技术经济指标:建立了禽流感间接ELISA(iELISA)和斑点-ELISA(Dot-ELISA)诊断技术,试装了禽流感iELISA和Dot-ELIsA诊断试剂盒并成功地初步应用于现地。该两种诊断技术及诊断试剂盒与鸡新城疫(ND)等其他15种鸡疫病阳性血清均没有交叉反应性,检出的抗体能被禽流感病毒(AIV)中和;能100%检出已知阴性(146份)、已知阳性(198份)、琼扩(AGP)阳性、血凝抑制(HI)阳性及HI阳性、AGP疑是的血清样品。试剂盒各试剂在-15℃至-20℃保存360天,稳定性好。其特异性和敏感性均达到国际同类产品的先进水平。与国内外同类技术的比较:国外学者对iELISA检测禽流感抗体进行了不同程度的研究,认为其特异性强、敏感性高;建立的iELISA诊断技术及试装的iELISA诊断试剂盒与美国进口的iELISA试剂盒比较,其特异性和敏感性完全一致,已达到国外同类技术先进水平。研制的Dot-ELISA诊断技术及诊断试剂盒经最新的查新结果表明为国内外首创,填补了国内外禽流感早期快速诊断的该项技术空白,属国内外领先水平。成果推广应用情况及取得的经济、社会效益:现已制备快诊板14批、快诊膜16批,共25000多羽份,其中15000多羽份已试装成禽流感iELISA和Dot-ELISA诊断试剂盒,初步应用于中国广西、广东、福建、安徽、江苏、辽宁、山东、河北、上海、黑龙江等十几个省、市12000多羽份鸡血清样品的检测,其应用范围覆盖省、市兽医站、研究所、农业院校、农科院、农业公司、口岸检疫部门及鸡场等各领域。实验室试验及现地反馈信息认为:该试剂盒操作简便,特异性强、敏感性高、结果判定方便、直观’、快速准确,很适用于禽流感的现地疫病诊断、流行病学调查、口岸检疫等,已形成较成熟的技术,完全可以向国内外推广应用。中国是世界第一养禽大国,养禽总量达100亿羽,禽流感的防制直接关系到中国养禽业的持续稳定发展和人民的身体健康,早期快速诊断和疫病监测是禽流感防制的关键技术。禽流感iELISA和Dot-ELISA诊断技术和诊断试剂盒的研制成功及应用,不仅填补了国内外禽流感诊断技术的一项空白,而且为中国禽流感的防制提供了先进、有效的早期快速诊断技术及监测手段;对控制禽流感的发生与流行,促进中国养禽业的健康发展及社会稳定,促进中国社会经济发展和社会进步具有十分重要的意义。该流感iELISA及Dot-ELISA诊断技术及诊断试剂盒填补了国内外禽流感诊断技术的一项空白,为中国禽流感的防制提供了先进、有效的早期快速诊断技术及监测手段;该试剂盒由成套的成品试剂组成,使用者自备生理盐水,按说明书操作即可对大量样品同时进行检测,并具有用样少、特异性强、敏感性高、简便快速、结果。
完成人 于康震 李海燕 辛晓光 张晶 邓国华 田国斌 唐秀英
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