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肿瘤血清RNA检测技术的优化及血清microRNA生物标志物鉴定与应用

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项目年度编号 1600560072
中图分类号 R730.4
成果公布年份 2015
成果简介 项目主要研究内容、科学发现点、科学价值,同行引用及评价等:miRNA是一类相对保守的,具有调控功能的非编码RNA,在肿瘤的发生、发展过程中具有重要作用,具备成为一种可高灵敏检测恶性肿瘤标志物的潜力。该课题组的研究鉴定了一些与乳腺癌和肝癌相关的miRNA,主要利用高通量测序和real-time技术开展肿瘤血清中miRNA的表达和机理研究,在肿瘤相关探针设计、芯片制备、以及数据处理等方面进行研究,系统发现及鉴定肿瘤早期诊断和转型判断的血清microRNA标志物。在实验方法上:建立高效的microRNA分离纯化技术,实现微量血清microRNA组分的分离;筛选、鉴定若干与肿瘤疾病相关的血清microRNA生物标志物;针对不同肿瘤获得的microRNA疾病标志物,设计高灵敏度的microRNA实施荧光定量检测试剂盒,并在临床样本中进行验证。在乳腺癌研究上,通过高通量测序方法筛选乳腺癌浸润转移相关miRNA;进行近50例临床样本的验证,初步阐明目标miRNA对乳腺癌浸润转移的作用;通过real-time PCR检测验证目标miRNA在临床样本的表达量,并结合完整的临床资料,分析目标miRNA与患者预后的关系。为乳腺癌患者的预后评价提供一个可靠的技术。可能为检测、监控恶性癌前病变提供潜在的标志物,建立相应的乳腺癌病变监控技术。相关研究论文:Wang F, Zheng Z, Guo J, Ding X* Correlation and quantitation of miRNA aberrant expression in tissues and sera from patients with breast tumor. Gynecologic Oncology,2010, 119(3):586-593引用超过158次)。在肝癌miRNA方面,对肝脏疾病相关的血清microRNA生物标志物的筛选及鉴定。主要从肝脏疾病患者血液样本的采集及血清分离,应用高通量实时荧光定量PCR全面分析患者及对照血清中发生差异表达的microRNA的种类;在大样本量条件下,对其中具有潜在临床价值的候选microRNA进行验证,鉴定若干能用于肝癌疾病诊断的血清microRNA标志物,同时对血清microRNA检测试剂盒的开发。该项目的实施在基础研究和临床应用两方面均具有重要的意义,不仅将提升中国在相关研究领域的水平,还将为临床常见的肝损伤、肝炎和肝癌等重大疾病的诊断和治疗提供新的、更加灵敏的检测指标。该研究申请到授权专利3项,建立"一种生物样本中miRNA绝对表达量的检测方法"(ZL 2008 1 0120867.5);寻找到肝癌的"microRNA生物标志物及其用途"(ZL 2010 1 0220241.9),建立起"一种从人血清/血浆样本中分离RNA方法及其PCR验证法"(ZL 2010 1 0220262.6)。
完成单位 浙江理工大学
完成人 丁先锋 朱聪 郭江峰
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