换一批
换一批
项目年度编号
2000140083
中图分类号
S941.42
成果公布年份
2020
成果简介
水产动物疾病成为危害水产养殖业健康发展的重要阻碍。水产动物疾病的防治主要包括药物防治和免疫防治，其中免疫防治绿色、安全，具有重要的生态环境保护意义。鱼类属于低等脊椎动物，免疫系统不发达，因此需要进行免疫系统的激活或诱导来提高鱼类对病原的免疫抵抗力。树突状细胞（dendritic cells，DCs）作为动物机体功能最强的专职抗原递呈细胞，具有其特有的树突样突起和细胞表面标记，是连接固有免疫和获得性免疫的重要桥梁，通过激活树突状细胞能够提高宿主对病原的免疫抵抗力。
该项目通过对虹鳟树突状细胞体外分离培养、转录因子的克隆和诱导树突状细胞分化与成熟、免疫刺激物对树突状细胞的定向激活以及在细菌性疾病防治中的应用等研究，形成成果如下。
（一）主要技术成果：
（1）建立了虹鳟DCs体外诱导培养模型。采用重组的IL-4蛋白刺激分离的虹鳟头肾粘附白细胞，7d后，培养细胞高表达DCs表面标记基因（如MHCⅡ、CD83和CD209/CLEC4T1等），低表达其他白细胞表面标记基因（如T细胞标记基因：TCRα和TCRβ；B细胞标记基因：mIgM、mIgD和mIgT），经Toll样受体配体（LPS、polyI：C、flagellin和R848）刺激后细胞形态发生改变，树突样伪足变长，提示诱导的DCs可能被激活变为成熟的DCs。
（2）鉴定了虹鳟树突状细胞转录因子ZNF366和ZBTB46，发现其均具有高度的保守性。ZNF366和ZBTB46均能够在单核/巨噬细胞系RTS-11、原代头肾巨噬细胞和IL-4/13A培养的头肾巨噬细胞中表达，而且它们的表达都受到细菌和病毒PAMPs的差异调节。在RTS-11细胞和原代头肾巨噬细胞中，所有ZBTB46和ZNF366基因的表达均被干扰素γ诱导下调，但不受IFN2 (type I IFN)影响。而且，当鲁氏耶尔森氏菌感染虹鳟后，ZBTB46和ZNF366基因在鳃中表达显著减少。提示ZBTB46和ZNF366可能对DCs分化与成熟具有负调节作用。
（3）鉴定了虹鳟树突状细胞转录因子BATF3，发现其与人和鼠同源的转录因子具有较高的一致性。BATF3基因在IL-4诱导的虹鳟头肾粘附白细胞中具有较高表达，当用Toll样受体配体（LPS、polyI：C和R848）刺激后其表达显著上调；当鲁氏耶尔森氏菌和IHNV感染虹鳟后，BATF3基因在其头肾中表达显著上调。提示BATF3可能对DCs分化与成熟具有正调节作用，而且BATF3依赖型DCs可能与抵抗细胞内病原感染有关。
（4）定向激活树突状细胞在冷水性鱼类细菌性疾病防治中的应用。通过制备脂多糖佐剂与灭活鲁氏耶尔森菌一同注射免疫虹鳟，一个月后，采用鲁氏耶尔森菌感染虹鳟，免疫保护率约45%-55%。
（二）证书、标准、论文和专利：
发表论文2篇，其中SIC收录2篇。
完成单位
内江师范学院
完成人
王均 刘杰 苟印
- 浏览0
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
