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项目年度编号
99041947
中图分类号
R987
成果简介
ＨＬＡⅡ类抗原在免疫反应中起着重要的作用。控制ＨＬＡⅡ类抗原的基因在ＨＬＡ－Ｄ区，主要包括ＤＲ、ＤＱ和ＤＰ三个亚区。经典的方法用血清学，细胞学方法检出ＨＬＡ抗原。在ＤＮＡ水平检出Ⅱ类抗原的基因有更强的鉴别能力，有利于发现新的特异性。该成果自已设计从全长ＤＲＢ、ＤＱＢ ｃＤＮＡ探针制备较短的亚探针作ＨＬＡ－Ｄ区基因的ＲＦＬＰ分型，减少了杂交片段数目，使多态性格局大为简化，从而更便于实际应用。据此用一个酶和ＤＲＢ－ＳⅡ亚探针和ＤＱＡ探针对上海地区９０名随机汉族进行了ＨＬＡ－Ｄ区基因的ＲＦＬＰ分型。通过与白种人杂交格局比较，发现中国人特有的ＤＲ和ＤＱ的连锁，并发现两个新的ＤＲ１２（５）的亚型ＤＲＳａ和ＤＲＳｂ。用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＨＬＡ基因，并且顺序特异的普核苷酸（ＳＳＯ）探针杂交是近年来发展起来的新的分型技术，只要用少量ＤＮＡ就可检出一个核苷酸之差的各等位基因。用此技术对８５名彝族和３４名汉族进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ、ＤＱＡ、ＤＯＢ和ＤＰＢ基因分型。并检出两个新的ＤＲ１５（２）的等位基因ＤＲＢＩ＊１５Ｙ１和１５Ｙ２。根据分型结果作统计分析，发现纯粹族ＨＬＡ－Ｄ区各等位基因频率、单倍型频率与南方汉族和南方少数民族较为接近，与北方汉族有较大差异，在基因水平支持了中华民族在华南和华北两大群体的假说。ＤＮＡ水平的分型不但在人类学研究中，而且在疾病关联研究中重大作用。原发性干燥综合征是一种自身免疫性疾病，为寻找疾病的遗传背景，用ＤＮＡ分型技术进行了原发性干燥综合征ＨＬＡ关联研究。发现不同人种有不同的疾病易感的ＨＬＡ单倍型。白种病人的与ＤＲＢＩ＊０３０１－ＤＱＢＩ０２０１关联，而中国病人ＤＲＢＩ＊０８０３－ＤＱＡＩ８０１０３－ＤＱＢＩ８０６０１显著增高。分析不同人种疾病易感的ＤＱＢＩ核苷酸顺序推断的氨基酸顺序，发现有共同的肽段，为深入分析创造了条件。
完成单位
上海第二医科大学基础医学院
完成人
费虹明 陈仁彪 蒋伟宏 陆嫣 范丽安 王伟成
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