换一批摘要目的:建立快速检测实验大鼠冠状病毒和仙台病毒的双重PCR 方法. 方法:根据大鼠冠状病毒N 基因、仙台病毒L 基因设计特异性引物;经过双重PCR 优化,特异性和敏感性的检测,建立双重PCR 体系.应用该PCR 体系检测人工感染仙台病毒组织DNA 样本和实验动物组织样本,并与ELISA 方法比对. 结果:双重PCR 扩增出大鼠冠状病毒(168bp)和仙台病毒(262bp)目的条带,PCR 扩增产物测序结果利用核酸BLAST 功能进行同源序列对比,仙台病毒和大鼠冠状病毒同源性分别为100％和99％.仙台病毒和大鼠冠状病毒的检测下限为1.56 × 102copies/μL.特异性检测对小鼠肝炎病毒扩增,产生片段大小近似大鼠冠状病毒产物.应用建立的双重PCR体系检测人工感染仙台病毒组织DNA 样本,30份DNA 标本均被检出;检测94份实验动物肺组织样本,结果均阴性. 结论:建立的双重PCR 方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高,能够实现对实验动物仙台病毒和大鼠冠状病毒病原体的快速检测.
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作者
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母体文献
会议名称
2019年京津冀实验动物科技年会
河北承德
2019年
分类号
R511.04（传染病）
发布时间
2023-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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