纤维母细胞生长因子-1通过抑制TGFβ1信号通路缓解肾脏纤维化-论文-万方医学网

纤维母细胞生长因子-1通过抑制TGFβ1信号通路缓解肾脏纤维化

摘要目的探讨纤维母细胞生长因子-1(Fibroblast Growth Factor-1)在肾脏纤维化中作用方法 1.研究AKI患者外周血FGF-1对AKI向CKD转归的预测意义根据医学伦理学要求,在征得患者同意的前提下,设计前瞻性随机临床试验,根据KDIGO指南对AKI的定义,设置纳入和排除标准(48小时内血肌酐下降大于等于26.5umol/l；确认或推测7天内升高到基线值的1.5倍；连续6小时尿量少于0.5ml/kg/h,排除尿路梗阻和其他原因导致尿量减少者),ELISA法检测200例左右AKI患者外周血FGF-1水平,跟踪随访了解其慢性化的情况,明确外周血中FGF-1的预测意义.2.体外实验：提取原代肾小管上皮细胞,设置4组实验即正常组,FGF-1刺激组,TGFβ1刺激组,FGF-1+TGFβ1刺激组.在不同时间点收集细胞,采用蛋白印迹及荧光定量PCR技术,检测炎症因子、趋化因子指标,纤维化、促纤维化因子指标.3.体内实验：构建重度小鼠肾脏缺血再灌注损伤的急性及慢性化模型,各设置4组即模型组.模型+FGF-1刺激组,模型+TGFβ1刺激组,模型+FGF-1+TGFβ1刺激组.分别检测各组小鼠血肌酐,尿素氮等肾功能指标.采用免疫荧光,蛋白印迹及荧光定量PCR技术,急性期检测炎症因子、趋化因子指标,慢性期检测纤维化、促纤维化因子及肾小管增值与凋亡指标.