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脂蟾毒配基对HL-60细胞分化的影响

摘要目的:探讨脂蟾毒配基诱导HL-60细胞分化与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。方法:体外培养人白血病HL-60细胞系,Rhodamine 123染色标记活细胞线粒体,荧光显微镜下观察脂蟾毒配基(RG)对线粒体形态的变化;酶联免疫检测仪检测硝基蓝四氮唑(NBT)还原实验检测脂蟾毒配基对细胞分化的作用;流式细胞仪检测细胞表面的分化标志物CDIlb的表达,细胞周期及线粒体膜电位(Dym)变化,Westernblotting检测与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。结果:经0.1μmol/I,lμmol/L,10μmol/L脂蟾毒配基分别作用48h、72h后,荧光显微镜下观察,对照组细胞内线粒体呈绿色荧光,均匀分布;随脂蟾毒配基作用浓度和时间的延长,细胞体积逐渐变小,胞内线粒体荧光强度显著减弱;NBT还原反应的吸光值增加;分化标志物CDllb表达增强,Bcl-2和Procaspase-3蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高。结论:脂蟾毒配基低浓度诱导人白血病HL-60细胞分化,高浓度作用下引起癌细胞发生凋亡。

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