摘要目的:制备抗非小细胞肺癌相关多肽的IgY抗体,并进行肺癌ELISA检测试验研究. 方法:用人工自动合成仪合成两条肽段(长度分别为64AA和36AA),并分别偶联KLH作为抗原免疫鸡产生IgY抗体,水稀释-辛酸法结合硫酸铵沉淀法分离提取IgY,亲和层析进一步纯化特异性IgY,间接非竞争酶联免疫吸附法检测抗体效价,棋盘滴定法选择ELISA的最适工作条件.将抗64AA肽IgY抗体(Ab1)和抗36AA肽IgY抗体(Ab2)联合,用ELISA法检测肺癌血清样本96例,正常人样本102例. 结果:成功制备了非小细胞相关多肽IgY抗体,效价Ab1为1:104,Ab2为1:105,用Ab1和Ab2组合作联合检测,以临界值0.241为阳性判断标准,96例肺癌患者血清中,阳性58例,敏感度为60.4[%],102例正常人血清中,阳性19例,特异度81.4[%]. 结论:运用IgY技术可以高效、大量制备多肽抗体,非小细胞肺癌相关多肽IgY抗体的ELISA检测试验表明IgY技术在肺癌诊断中有很好的应用前景.
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