摘要目的:探索肠球菌表面蛋白基因在粪肠球菌生物膜形成过程中的作用。 方法:应用微量滴定板法和共聚焦激光显微镜对两株esp(+)表型菌株(esp54和espll262)和1株esp(一)表型菌株(V583)的生物膜定量分析,评价不同esp表型菌株生物膜的差异。另外应用RT-PCR观察esp54和espll262在生物膜形成过程中esp表达随时间的变化。 结果:两种方法定量分析发现:esp54生物膜的最大厚度、平均厚度、生物膜体积和结晶紫结合量均大于espll262和V583,而粗糙分数最小(P<0.05)。而V583与espll262比较,最大厚度较大(27.03±1.11 vs 17.33士6.94,p<0.05),但生物膜体积结果则相反(3.64±0.54 vs 10.31士0.41,p<0.05),粗糙分数较大(1.00士0.16 vs 0.37±0.02,p<0.05)。在生物膜形成过程中,esp54在96小时之前espmRNA的表达量随时间延长而增加,而espmRNA在espll262生物膜中的表达则在12小时后一直保持低水平。esp54在第24,48和72小时espmRNA的表达量均高于espll262,其中二者在24小时和72小时的差异有统计学意义(P<0.05)。两株细菌在一定时间段内espmRNA表达量的变化与生物膜厚度变化的趋势一致。 结论:虽然esp并不是粪肠球菌生物膜形成的必须因素,但esp的表达在生物膜形成过程中可能促进生物膜中更多细菌的粘附,使生物膜分布更均匀、稳定。
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