检索历史 清除

摘要目的：耳蜗前体细胞(CPCs)是一类存在于新生鼠类耳蜗内的前体细胞，可在体外增殖并分化出包括听觉毛细胞和支持细胞在内的所有耳蜗细胞类型。因此CPCs有希望应用于损伤后毛细胞的替代治疗。此外，CPCs在体外的分化过程可为我们提供研究耳蜗发育机制的体外模型，miRNA是一类高度保守的长度在22 nt左右的内源性非编码单链小RNA，具有调节细胞增殖、分化、凋亡和影响细胞命运的重要作用。我们拟用实时定量PCR技术观察miR-183家族在耳蜗前体细胞增殖和分化过程中的变化，并和神经干细胞(NSCs)的分化过程加以比较。<br>　　方法：分别从新生大鼠仔鼠耳蜗和嗅球中分离和培养CPCs和NSCs，加入血清促使两种悬浮生长的细胞贴壁并分化。收集CPCs细胞球和CPCs来源的分化6天和14天的细胞，提取总RNA，用实时定量PCR技术检测miR-183家族三个成员miR-96/182/183在三个分化时间点的表达变化。收集NSCs细胞球和NSCs来源的分化6天和14天的细胞，分析每个miRNA在三个时间点的表达变化，并与其在CPCs分化过程的表达变化加以比较。<br>　　结果：miR-183家族的三个成员在CPCs分化过程中表达模式不同。miR-96和miR-182的表达量均随着分化的进行急剧下降，miR-96在分化第14天时的表达量下降至未分化阶段的15%，miR-182下降至未分化阶段的4%。而miR-183先是随着分化表达量增高至未分化阶段的2.3倍达到高峰，然后在分化第14天的时候下降至未分化阶段的15%。miR-96和miR-183均无法在NSCs分化过程中检测到，miR-182仅能在未分化的NSCs中检测到，但表达量极低，仅为CPCs的5%。经统计学检测，以上变化均具有统计学意义。