换一批摘要目的:应用脂多糖胺纳米囊泡(iipopolysaccharide-amine nanopolymersomes,LNPs)作为基因载体,评价其与目的基因复合及其后在骨髓间质干细胞中的转染情况,为LNPs介导的基因联合干细胞治疗骨缺损提供初步实验依据. 方法:制备加载了骨形态发生蛋白2质粒(plasmid of bone morphogenetic proteins 2,pBMP2)的脂多糖胺纳米囊泡(plasmid-loaded lipopolysaccharide-amine nanopolymersomes,pLNPs);通过凝胶阻滞实验探究LNPs与pBMP2结合能力;透射电镜及原子力显微镜下观察pLNPs;动态光散射仪检测其粒径及zeta电位;探究pLNPs耐酶解能力随时间的变化规律;体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs),评价pLNPs细胞毒性、转染效率及目标蛋白表达. 结果:当N/P≥1.5时，LNPs可完全阻滞pBMP2;N/P为60时，pLNPs透射电镜下呈纳米囊泡状，pLNPs粒径为123士6nm. zeta电位为20mV; pLNPs在4h内耐DNaseI酶解，6h时对核酸保护能力稍下降;LNPs介导pBMP2转染bMSCs的最佳N/P为60，此时转染效率高达91.4％，细胞存活率为92. 2%. 4d内细胞持续高表达BMP2，其峰值为619pg/mL,较PEI 25k和lipofectamine2000有更高的转染效率及更多的蛋白表达量。 结论:pLNPs是安全高效的基因传递系统，预期在骨再生治疗中有潜在的应用前景。
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