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加味乌梅丸抑制NOD/SCID小鼠胰腺癌移植瘤的比较蛋白组学研究

摘要目的:通过研究加味乌梅丸治疗后NOD/SCID小鼠人胰腺癌细胞移植瘤组织的差异蛋白表达谱及生物信息学分析,初步探讨加味乌梅丸抗胰腺癌的分子机制. 方法:NOD/SCID小鼠皮下移植瘤造模成功后,20只荷瘤小鼠分为对照组、用药组两组,每组10只.用药组每日灌胃加味乌梅丸煎剂,对照组每日给予等体积无菌注射用水.给药20天后处死小鼠,取移植瘤组织,提取细胞总蛋白,运用iTRAQ技术进行蛋白组学分析.运用蛋白免疫印迹及免疫组化两种方法对差异蛋白进行再验证,证明蛋白组学结果的可靠性. 结果:蛋白质组学分析结果显示,与对照组比较,有17个差异蛋白质点,其中15个表达下调,2个表达上调,进一步研究分析发现加味乌梅丸极有可能通过下调肌浆球蛋白调节轻链2(MLCⅡ)、肌质、肌浆/内质网钙ATP酶(sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase)、碳酸酐酶3(CAⅢ)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)4个差异蛋白表达,并上调硒结合蛋白(selenoprotein)、高迁移率蛋白17 (HMG-17)2个差异蛋白表达来发挥抗肿瘤作用,我们推测这6个蛋白即为加味乌梅丸的作用靶点.蛋白免疫印迹及免疫组化的结果证明了蛋白组学结果的可靠性. 结论:肌浆球蛋白调节轻链2 (MLCⅡ)、肌质、肌浆/内质网钙ATP酶(sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase)、碳酸酐酶3(CAⅢ)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)、硒结合蛋白(selenoprotein)、高迁移率蛋白17 (HMG-17)极有可能为加味乌梅丸的作用靶点.

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