基于间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的初步探索-论文-万方医学网

基于间接ELISA法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA整体甲基化的初步探索

摘要目的用间接ELISA 法检测长爪沙鼠肝脏基因组DNA 整体甲基化的水平,以用于今后评价沙鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型及筛选甲基化水平的遗传标记。方法选取新生仔鼠6只(ZS组),3 月龄鼠12 只(正常对照组6 只,标记为3Y 组),高脂饮食诱发的模型组6 只,标记为4M 组),8月龄中老年鼠6 只(标记为LN 组),均为雄性,按组采集血清(新生鼠除外)用于总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)检测,同时采集肝脏标本二份,一份作常规HE 染色的病理学观察,一份提基因组DNA,用ELISA 法试剂盒检测肝脏基因组DNA整体甲基化的水平(即5-mc 含量)。结果模型组鼠及8 月龄组沙鼠均出现高脂血症,血清TC 及TG 均不同程度地出现了显著上升,对照组鼠血脂正常。病理学检查发现,模型组与8 月龄组肝脏出现较为明显的脂肪变性,而青年组肝脏无异常发现,新生仔鼠肝血窦中可见大量成堆分布有单核细胞和红细胞。肝脏基因组DNA整体甲基化检测结果看出高脂饲料诱导的模型组青年沙鼠＞新生仔鼠＞老龄鼠＞对照组青年鼠。结论间接ELISA法检测肝脏基因组DNA整体甲基化水平简便、迅速,成本低,可以作为评价其表观遗传学的一种方法。