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Atezolizumab对人源化膀胱癌CDX模型小鼠的免疫治疗作用研究

摘要目的:建立人源化皮下荷瘤膀胱癌CDX 小鼠模型,研究Atezolizumab(MPDL3280A)的免疫治疗机制,为人源化膀胱癌CDX 小鼠模型的应用与评价提供实验依据.方法:建立NOD/scid IL2Rg-/-(NSI)负荷人T24膀胱癌细胞小鼠肿瘤模型;Ficoll法分离人脐带血PBMC;辐照量500cGy;尾静脉注射5×106细胞数人PBMC 进行人源化; Atezolizumab(10mg·kg-1,i.v)每周尾静脉给药2 次,连续治疗4周;肿瘤称重与测定体积比较药效;FACS检测外周血与脾脏人T淋巴细胞CD3、CD4、CD8;人B 淋巴细胞CD19,人NK 细胞CD56;肿瘤组织中浸润人T 淋巴细胞亚型CD3、CD4、CD8 比例,T细胞激活标记分子CD25、CD69,T细胞耗竭标记分子PD1、TIM3及肿瘤PDL1表达情况.结果:与空白对照组相比,Atezolizumab 组能明显降低肿瘤大小,其差异具有统计学意义(P<0.01);Atezolizumab 组人T淋巴细胞比例占总外周血细胞比例分别为85.9 ± 5.6%;Atezolizumab 组与空白对照组中人B 细胞、NK 细胞及髓系细胞均无检测到;Atezolizumab 组中人T 细胞亚群CD8+/CD4+比例升高,但激活分子CD25、CD69 均无明显差异,Atezolizumab 组中T 细胞耗竭分子PD1、TIM3 均具有显著性差异(P<0.05);Atezolizumab 组中肿瘤PD-L1 表达较明显下降(P<0.01);Atezolizumab 不仅对肿瘤PD-L1 具有明显抑制作用,还能间接抑制PD1 促进NSI 小鼠体内人源T 细胞的增加.结论:人源化膀胱癌 CDX 小鼠模型能良好评价药物的免疫治疗作用,为具有T 淋巴细胞特征的肿瘤免疫评价模型,对抗肿瘤化药或中药筛选具有潜在的应用前景.

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