腹泻病例中致泻性大肠埃希菌PCR毒力基因检测及分子分型分析

PCR Virulence Gene Detection and Molecular Typing Analysis of Diarrheal Escherichia Coli in Diarrhea Cases

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摘要目的通过多重荧光定量PCR法及脉冲场凝胶电泳对腹泻病例致泻性大肠埃希菌(DEC)菌株进行毒力基因检测,耐药情况及分子分型分析.方法选取2021年1月至2023年12月无锡市惠山区疾病预防控制中心检验科接收的100例腹泻病例,对病例肛拭子标本通过多重荧光定量PCR法进行毒力基因检测,并对菌株进行耐药性检测,分析DEC毒力基因型、DEC流行情况与耐药情况及脉冲场凝胶电泳分子分型.结果本次共分离104株DEC,以EAEC型别居多,共计63株,其中携带astA/pic毒力基因59株;其次为ETEC,共计35株,其中携带estIa/esib毒力基因21株;EPEC为5株,携带eae毒力基因;EHEC为1株,携带Eae,stxl/stx2毒力基因.经过对100例腹泻病例进行分析发现,各个年龄段均可能感染DEC,其中≥60岁患者占比相对比较少,检出率主要集中在20～39岁,各个年龄段感染主要以EAEC为主;对104株DEC做抗生素敏感试验,结果发现,菌株对头孢他啶、亚胺培南敏感率分别为92.31％和99.04％,菌株在亚胺培南以外的药物中均出现一定的耐药性,其中氨苄西林最高,其次为四环素、萘啶酸、复方新诺明、头孢唑林、氯霉素;在104株DEC菌株中抽取16株采取限制性内切酶XbaI消化,通过脉冲场凝胶电泳对有效条带进行分析发现,在DNA分子水平上表现为高度多态性,同源性相对比较低,未发现完全相似的菌株,部分菌株在遗传相似度方面达到90％以上.结论致泻性大肠埃希菌患者中多以EAEC感染为主,患者往往对氨苄西林存在比较高的耐药率,各医院应引起高度重视,不断对PFGE分子分型数据库进行完善,加强疾病防控措施.