银杏叶提取物对三氯乙烯诱导的人角质形成细胞NO合成的影响
Effect of Ginkgo Biloba Extract on Trichloroethylene-induced Nitric Oxide Synthesis in Human Keratinocytes
摘要背景与目的: 观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)诱导的人角质形成细胞(kenatinocyte,KC)一氧化氮(NO)合成和一氧化氮合酶(NOS)基因表达及活性的影响,为探讨TCE职业性皮炎的机制及保护因子提供理论依据.材料与方法: 分离的KC用无血清培养基进行原代培养至80%以上融合时,加入不同浓度的GBE预适应2 h后再用2.0mmol/L的TCE染毒4 h,以不含染毒的培养基作为对照组.根据试剂盒的方法检测NO含量和NOS活力,同时用RT-PCR的方法检测细胞iNOS mRNA的表达情况.结果: 2.0 mmol/L的TCE处理组NO含量和iNOS活力分别为(41.22±5.45)μmol/L和(0.53±0.07)U/4×105 cell,明显高于对照组(24.20±3.72)μmol/L和(0.31±0.03)U/4×105cell.而TCE对KC cNOS活力无影响.10、50和100mg/L GBE保护组未见NO含量的明显下降,150 mg/L GBE则能够拮抗2.0 mmol/L TCE所致的NO水平和iNOS活力的升高.RT-PCR结果显示GBE的预处理可以抑制TCE诱导的KC iNOS mRNA的过表达.结论: TCE通过诱导KC iNOS基因上调产生大量的NO,GBE对TCE诱导的KC iNOS活力的升高以及iNOS基因表达的上调有抑制作用,也进一步抑制了NO的过量生成,可能对TCE皮肤损害具有保护作用.
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