筛选化学诱变原的RNR3调控重组Lac Z基因酵母细胞的建立
Development of recombinant gene yeast cell regulated by RNR3 LacZ promoter for screening chemical mutagens
摘要目的:建立可筛选化学诱变物的RNR3调控重组Lac Z基因酵母细胞。方法:利用降式PCR技术从酵母基因组中扩增RNR3启动子,将其插入到pMP206/ERE酵母报告载体,构建成RNR3调控的Lac Z酵母报告载体,将该载体转入W303-1A酵母细胞,构建成RNR3调控的重组Lac Z基因酵母细胞。用数种化学诱变原作用于该重组基因酵母细胞,观察其对RNR3的诱导表达。结果:放线菌素D、丝裂霉素C、阿非迪霉素和溴乙锭不能诱导RNR3的表达,而甲磺酸甲脂、瘤可宁、顺铂、4-硝基-N-氧化喹啉、博来霉素、福莱霉素、5-氟尿嘧啶、喜树碱和羟基脲诱变原与RNR3表达有明显的剂量效应关系。结论:该重组酵母可用于对多种化学诱变原的快速筛选。
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