换一批
换一批肝脏型脂肪酸结合蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备和鉴定
Preparation and identification of monoclonal antibody against liver fatty acid binding protein
摘要目的：制备抗肝脏型脂肪酸结合蛋白(LFABP)的单克隆抗体(mAb)并进行亚型和特异性鉴定。方法：以重组的LFABP蛋白为免疫原，经过原核表达和纯化后，免疫BALB/c小鼠，获得分泌鼠抗人LFABP蛋白mAb的杂交瘤细胞株，通过ELISA和Western blot方法检测其特异性。结果：纯化的LFABP重组蛋白免疫小鼠后经过筛选得到2株稳定分泌抗人LFABP的mAb杂交瘤细胞株，分别命名为3E6和5B7，其亚型分别为IgG1和IgG2a，抗体经纯化后浓度达到2 mg/mL，效价达到1∶10000以上。Western blot分析结果表明可与细胞中表达的内源LFABP发生特异性免疫反应。结论：成功制备了鼠抗人LFABP的mAb，为进一步研究LFABP的生物学特性，并为相关疾病的治疗奠定了基础。
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关键词
肝脏型脂肪酸结合蛋白原核表达杂交瘤单克隆抗体liver-type fatty acid binding proteinprokaryotic expressionhybridomamonoclonal antibody
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1004-616x.2014.03.013
发布时间
2014-06-28
基金项目
河南省重点科技攻关项目
河南城建学院校内基金
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