亚硫酸钠对HL-7702细胞极低密度脂蛋白组装分泌和内质网应激的影响

Effects of sodium sulfite on very low density lipoprotein assembly and secretion, and endoplasmic reticulum stress in HL-7702 liver cells

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摘要目的:研究亚硫酸钠(Na2SO3)是否通过抑制极低密度脂蛋白(VLDL)组装分泌和诱导内质网应激引起肝细胞脂肪变性.方法:分别经不同浓度(0.1、0.5、2.5、10 mmol/L)Na2SO3染毒人正常HL-7702肝细胞24和48 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和Western blot测定细胞外VLDL水平;采用荧光定量PCR法(qPCR)检测VLDL组装相关因子微粒体载脂蛋白B100(apoB 100)、甘油三酯转移蛋白(MTP)、二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)、甘油三酯水解酶(TGH)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测内质网应激相关重链结合蛋白(BiP)和钙连蛋白(Calnexin)的表达水平.结果:ELISA和Western blot结果显示染毒24 h后,与阴性对照组相比,各Na2SO3处理组VLDL含量均明显增加,差异均有统计学意义(P均＜0.05);而作用48 h后,各Na2SO3处理组VLDL含量与阴性对照组相比均无明显变化(P均＞0.05).qPCR检测结果显示,与阴性对照组相比,染毒24 h,10 mmol/L Na2SO3组肝细胞内apoB 100 mRNA表达升高(P＜0.05);2.5和10 mmol/L Na2SO3可使肝细胞内TGH mRNA表达升高(P＜0.05);染毒48 h,0.5和2.5 mmol/L Na2SO3引起肝细胞内TGH mRNA表达量明显升高(P＜0.05).Western blot结果显示染毒24 h和48 h后,不同浓度Na2SO3对细胞内BiP蛋白表达水平均无明显影响,但可以明显增加Calnexin蛋白表达(P＜0.05).结论:Na2SO3不能抑制VLDL组装分泌,但可能对肝细胞糖蛋白的正确折叠有一定干扰作用.