肉苁蓉苯乙醇总苷对大鼠肝星状细胞TGF-β1/Smad信号通路表达的影响

Effect of phenylethanol glycosides on the TGF-β1/Smad signaling pathway in the rat HSC-T6 hepatic stellate cells

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摘要目的:探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)对转化生长因子β1(TGF-β1)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化作用及对TGF-β1/Smad信号通路表达的影响.方法:试验分为正常对照组、5 ng/mL TGF-β1刺激的HSC-T6模型组、5 ng/mL TGF-β1+不同终浓度(25、50、75和100 μg/mL)CPhGs给药组,另设只加DMEM培养液的空白组.体外培养HSC-T6细胞,通过四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞的增殖;LDH比色法测定CPhGs的细胞毒性;采用荧光定量PCR(qPCR)检测Smad2、Smad3和Smad7 mRNA的表达;采用Western blot法检测Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3和Smad7蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,TGF-β1模型组显著促进了HSC-T6细胞的增殖,而50～100 μg/mL的CPhGs可以抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞的增殖(P＜0.05),且25～100 μg/mL的CPhGs对HSC-T6无明显细胞毒性作用;25～100 μg/mL CPhGs均可抑制Smad2和Smad3 mRNA和蛋白水平的表达,且明显抑制Smad2和Smad3蛋白的磷酸化水平,促进Smad7 mRNA和蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:CPhGs的抗肝纤维化作用可能与其阻断TGF-β1/Smad通路进而阻断HSC-T6细胞的活化和增殖有关.