换一批采用基于γ-H2AX焦点分析的流式细胞术检测纳米金颗粒的遗传毒性
Genetic toxicity of gold nanoparticles using flow cytometry based on γ-H2AX focus analysis
摘要目的:建立基于磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)生物标志物的流式细胞术遗传毒性检测方法,为纳米金颗粒的遗传毒性评价提供参考.方法:在加与不加体外代谢活化系统(S9)的条件下,分别设+S9短时处理组,选择终浓度为7.5、3.75和1.875 μg/mL的环磷酰胺(CP)处理4 h;-S9长时处理组,选择终浓度为6.4、1.6和0.4 μg/mL的依托泊苷(ETO)连续接触24 h,建立γ-H2AX生物标志物的流式细胞术检测方法.选择两种纳米金颗粒(样品1为溴化十六烷基三甲基溴化铵修饰,样品2为聚乙二醇修饰)作为实验材料,根据细胞毒性试验结果样品1和2分别选取3个不同浓度处理人成淋巴TK6细胞,分为+S9短时4 h组和-S9长时24 h组处理后收获细胞,采用γ-H2AX荧光抗体进行标记,流式细胞术分析γ-H2AX阳性细胞比例.同时设CP或ETO阳性对照和相应溶剂对照组.结果:与溶剂对照组相比,在有或无S9条件下,阳性对照组诱导产生的γ-H2AX阳性细胞比例显著增加(P＜0.05),并存在剂量反应关系(CP:R2=0.837,P=0.01;ETO:R2=0.903,P＜0.01),说明方法成功建立.在加与不加S9的条件下,两种纳米金样品各剂量组的γ-H2AX阳性细胞比例较溶剂对照组差异均无统计学意义(均为P＞0.05).结论:本实验建立了基于γ-H2AX焦点分析的流式细胞术遗传毒性检测方法,可用于纳米金颗粒的遗传毒性评价.
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分类号
R394.6
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-616x.2024.05.012
发布时间
2024-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省药品监督管理局科技创新项目（2021TDB07）
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