摘要目的:探讨E2F转录因子5(E2F5)在X射线诱导的人角质形成细胞HaCaT铁死亡中的作用.方法:HaCaT细胞经0、2.5、5、10、20 Gy X射线单次照射,照后24、48和72 h用CCK-8法检测细胞存活率,照后24 h用Western blot法检测细胞内E2F5、铁死亡标志蛋白环氧合酶-2(COX-2)和相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平;用10 Gy X射线照射HaCaT细胞,Western blot法检测照后24、48和72 h细胞内E2F5、COX-2和相关蛋白GPX4的表达水平,流式细胞术检测照后24和48 h细胞内亚铁离子和脂质过氧化水平,谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测照后48和72 h细胞内GSH水平,集落形成实验检测照后12 d细胞的集落形成能力;采用小干扰RNA(siRNA)转染技术使HaCaT细胞内E2F5蛋白表达沉默,并经10 Gy X射线照射,设未照射空白对照、照射对照、无义序列、E2F5沉默4组,CCK-8法检测受照后72 h HaCaT细胞存活率,Western blot法检测受照后24 h HaCaT细胞内COX-2蛋白的表达水平,流式细胞术分别检测受照后20 h HaCaT细胞内亚铁离子平均荧光强度和受照后24 h HaCaT细胞内脂质过氧化水平,集落形成实验检测受照后12 d HaCaT细胞的集落形成能力.结果:2.5～20 Gy X射线照射后24 h,以及5～20 Gy X射线照射后48和72 h,HaCaT细胞存活率降低(P＜0.05或P＜0.01);2.5～10 Gy X射线照射后24 h,细胞内E2F5蛋白表达增强;2.5～20 Gy X射线照射后24 h,细胞内COX-2蛋白表达增强,GPX4蛋白表达减弱(P＜0.05或P＜0.01);10 Gy X射线照射后48和72 h细胞内E2F5和COX-2蛋白均表达增强,GPX4蛋白表达减弱,细胞内GSH含量降低,照后24和48 h细胞内亚铁离子和脂质过氧化水平升高,照后12 d HaCaT细胞的集落形成能力降低(P＜0.05或P＜0.01).10 Gy X射线照射后,与无义序列组相比,E2F5沉默组细胞在照后72 h的存活率升高,照后24 h COX-2蛋白表达水平和脂质过氧化水平降低,照后20 h亚铁离子水平降低,照后12 d的集落形成能力增强(P＜0.05或P＜0.01).结论:X射线照射可能通过上调HaCaT细胞内E2F5蛋白表达促进细胞铁死亡,从而降低细胞的存活能力.