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一种高效干冻研磨破碎酵母细胞的方法

A Simple and Efficient Method to Break Yeast Cell by Dry-frozen Grinding

摘要[目的]建立简便有效的破碎酵母细胞的方法.[方法]离心收集酵母细胞,将培养液洗涤干净后直接将酵母细胞和研钵预冷至-20 ℃,然后在冰冻状态将酵母细胞置于研钵中研磨,在相差显微镜下观察酵母细胞的形态,计算细胞破碎效率,并提取破碎酵母的染色体DNA和蛋白质.[结果]镜下观察研磨后酵母完整细胞数明显减少,并有大量细胞碎片.计数得出研磨1、2、3、4、6、8、10 min后破碎细胞的百分数为13.7%、30.1%、52 0%、85.1%、93.4%、94.6%、95.9%,0.1 g酵母细胞研磨后抽提到的DNA和蛋白质的量分别为20 μg 和2.928 mg.常规条件干冻酵母细胞直接研磨获得良好的破碎效果,破碎效率达95.9%.[结论]该研究建立了一种简便、高效而又经济的裂解酵母细胞的方法.

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分类号 Q-31
DOI 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.29.016
发布时间 2011-01-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(21307017)
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