换一批
换一批摘要目的研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法用PCR方法扩增葡激酶cDNA，插入质粒pET-22b中构建成表达载体，转化入大肠杆菌BL21(DE3), 经IPTG诱导表达，表达产物用Q-Poros和S-Sepharose纯化。结果经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为葡激酶重组质粒，体外表达产物经离子交换纯化后HPLC纯度达98%以上，SDS-PAGE和Western Blot实验证实该产物为葡激酶。结论成功构建了重组葡激酶表达载体，并经表达纯化获得高纯度葡激酶，为产业化和临床应用奠定了良好基础。
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栏目名称
基础医学研究
DOI
10.3969/j.issn.1000-1492.2001.01.005
发布时间
2004-01-08
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