HPO205与COX6B1蛋白之间的相互作用
Interaction of proteins hepatopoietin 205 and cytochrome Coxidase subunit Vib polypeptide 1
摘要目的 以酵母双杂交(Y2H) 和GST融合蛋白沉降技术(GST-Pull down)来探讨肝细胞生成素205 (HPO205) 与细胞色素C氧化酶(COX)6B1间存在的相互作用,为研究HPO205的功能提供依据.方法 聚合酶链式反应(PCR)扩增HPO205和COX6B1的编码基因,分别构建至pDBLeu 和pPC86的重组Y2H 质粒载体.然后将二者的重组质粒共转染酵母MaV203进行Y2H鉴定,并用GST-Pull down 技术对其验证.结果 成功克隆HPO205和COX6B1编码基因至Y2H载体和相应表达载体.经过Y2H 鉴定发现,pDBLeu-GRER 和pPC86-COX6B1共转后能激活Ura、LacZ、His 3个报告基因;GST-Pull down 实验显示,GST-COX6B1能沉淀HPO205.结论 HPO205可能通过与COX6B1相互作用影响线粒体氧化磷酸化过程.
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