日本血吸虫无机焦磷酸酶的克隆表达及蛋白特征分析

Clone, expression and characterisation of Schistosoma japonicum inorganic pyrophosphatase

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摘要目的克隆并原核表达日本血吸虫无机焦磷酸酶(SjIPP),分析SjIPP的蛋白特征。方法以日本血吸虫成虫cDNA为模板,克隆SjIPP,重组入pET28a质粒,并将重组质粒转化入E. coli BL21,用SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组蛋白的表达和特异性,进一步分析SjIPP的蛋白特征和同源性。结果克隆和表达出的SjIPP均与预测的分子量大小一致,Western blot法结果显示,重组蛋白可被小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性识别。生物信息学分析表明,SjIPP为胞内蛋白,含有多个磷酸化位点,B细胞表位丰富,且与人和小鼠的IPP高度同源。结论成功克隆表达出SjIPP,为进一步利用SjIPP奠定基础。

作者曹红荣 ^[1] 徐云侠 ^[2] 丁淑琴 ^[3] 钟政荣 ^[3] 罗庆礼 ^[4] 沈继龙 ^[4] 学术成果认领

作者单位安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032; 徐州红十字中心血站质量管理科，徐州 221000 ^[1] 蚌埠医学院第一附属医院神经内科,蚌埠,233004 ^[2] 蚌埠医学院第一附属医院检验科,蚌埠,233004 ^[3] 安徽医科大学病原生物学教研室,合肥,230032 ^[4]

关键词日本血吸虫无机焦磷酸酶(EC3.6.1.1)克隆蛋白特征 Schistosoma japonicum inorganic pyrophosphatase(IPP,EC 3. 6. 1. 1)clone protein characterisati-on

主题词蛋白(Egg White)日本血吸虫(Schistosoma japonicum)无机焦磷酸酶(Inorganic Pyrophosphatase)质粒(Plasmids)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)

分类号 R383.2+4 R532.21

栏目名称 基础医学研究

发布时间 2013-12-19

基金项目

安徽省自然科学基金 安徽省教育厅自然科学研究重点项目