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全人源化PD-L1单抗功能活性及其对人肺腺癌HCC827细胞毒性作用的研究

Functional activity of humanized PD-L1 monoclonal antibody and its toxic effects on human lung adenocarcinoma cell line HCC827

摘要目的 初步探索自行研制的全人源化PD-L1单抗的功能活性及其对人肺腺癌HCC827细胞毒性作用的影响.方法 利用十二烷基硫酸钠聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定阿特朱单抗及自研PD-L1单抗的纯度;以阿特朱单抗为阳性对照,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测该自研PD-L1单抗的结合活性和竞争性阻断活性;细胞阻断试验分别测定两抗体的细胞阻断活性;流式细胞术(FACS)测定人肺腺癌 HCC827细胞表面PD-L1的表达;检测两抗体的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)效应.结果 SDS-PAGE鉴定出高纯度阿特朱单抗及自研PD-L1单抗;ELISA法检测结果显示自研PD-L1单抗、阿特朱单抗均可与人PD-L1结合并且阻断PD-L1与PD-1结合;自研PD-L1单抗及阿特朱单抗均可以阻断两细胞表面分子PD-L1与PD-1的结合,其EC50分别为0. 208 5,0. 154 8 μg/ml,在一定浓度上两者差异无统计学意义;FACS结果显示人肺腺癌HCC827细胞高表达PD-L1分子;细胞毒性实验结果表明当效应细胞与靶细胞比值一定时,自研PD-L1单抗与阿特朱单抗对人肺腺癌HCC827细胞都有强的毒性作用.结论 该自研全人源化PD-L1单抗有一定的功能活性,可通过阻断细胞表面的PD-L1与PD-1的结合而减弱T细胞受体信号,并可通过ADCC效应发挥一定的抗肿瘤作用.

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作者 谢庆书 [1] 束军 [1] 陈晴晴 [1] 胡思怡 [2] 学术成果认领
作者单位 安徽医科大学第四附属医院呼吸内科,合肥,230022 [1] 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司,合肥,230088 [2]
分类号 R734.2
栏目名称 基础医学研究
DOI 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.02.003
发布时间 2018-08-01
基金项目
安徽省自然科学基金面上项目 安徽高校省级自然科学研究项目
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