换一批
换一批体外siRNA-GAS5干扰肝癌HepG2细胞生物学行为改变
siRNA-GAS5 interferes HepG2 cells and changes in biological behavior in vitro
摘要目的 探究生长特异性调节转录因子5 (GAS5)在肝癌组织表达及GAS5小干扰RNA(siRNA-GAS5)转染对HepG2肝癌细胞的侵袭增殖的影响,并进一步分析其可能的调控机制.方法 选取手术肝癌切除的癌组织及其癌旁组织20例,qRT-PCR检测肝癌及其癌旁组织长链非编码RNAGAS5(GAS5)表达以及Western blot检测周期依赖性蛋白激酶6(CDK6)表达.利用脂质体转染siRNA-GAS5干扰HepG2细胞株中GAS5表达水平,划痕实验、Transwell和CCK-8检测转染后HepG2细胞的迁移、侵袭及增殖能力,流式细胞仪检测干扰后HepG2细胞凋亡周期变化.Westernblot、qRT-PCR验证细胞周期调控蛋白周期素D1(CyclinD1)、CDK6、E2F-1表达.结果 肝癌组织中GAS5表达水平低于对应癌旁组织,CDK6表达高于癌旁组织.转染siRNA-GAS5的HepG2细胞迁移侵袭增殖能力明显增强.转染siRNA-GAS5的HepG2细胞Cyclin D1、CDK6、E2F-1蛋白表达下降,干扰后的HepG2细胞周期发生G1/S期改变.结论 GAS5在肝癌组织的表达出现下调;GAS5可明显抑制肝癌细胞迁移、侵袭及增殖能力;GAS5调控肝癌细胞周期变化可能是通过CyclinDl/CDK6/E2F-1通路.
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栏目名称
基础医学研究
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.08.011
发布时间
2018-11-28
基金项目
国家自然科学基金
安徽省公益性技术应用研究联动计划项目
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