ARAP3-VAV2新结合方式鉴定与功能分析
Identification and functional analysis of new ARAP3 and VAV2 interaction model
摘要目的 探索腺苷二磷酸糖基化因子6的鸟苷三磷酸酶激活蛋白3(ARAP3)与VAV鸟苷交换因子2(VAV2)新的作用方式及可能的生理功能.方法 通过构建VAV2和ARAP3的突变体,在人子宫颈癌细胞(He La细胞)中共转VAV2的野生型和APAP3的突变体或者在人胚胎肾细胞(HEK-293T细胞)中共转ARAP3的野生型和VAV2的突变体,免疫共沉淀揭示二者的相互作用方式;在He La细胞中分别过表达VAV2和ARAP3野生型或突变体,荧光标记实验观察它们对纤维状肌动蛋白(F-actin)的调控作用.结果 除了肉瘤基因同源2(SH2)结构域以外,VAV2的N端(1-660氨基酸)区域亦能介导其与ARAP3的相互作用,He La细胞中过表达VAV2和ARAP3均能影响细胞内F-actin的形成.结论 VAV2多个结构域均能介导其与ARAP3相互作用,两者之间的相互作用可能是促进大鼠肉瘤同源癌基因A(Rho A)活性的动态变化或循环,从而调节细胞内F-actin动态性以及肿瘤细胞的迁移和侵染能力.
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