换一批miR-133b对喉癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及机制研究
Effects of miR-133b on proliferation, apoptosis and invasion of laryngeal carcinoma cells and its mechanism
摘要目的 探究miR-133b通过GSTP1对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、侵袭行为的影响及机制.方法 基于基因表达综合数据库(GEO)获取喉癌组织miRNA芯片高通量数据集GSE47610,采用QOE 3.2软件进行生物信息学分析,获得差异表达miRNA.通过实时定量PCR技术检测46例喉癌组织miR-133b相对表达量并分析其临床特征关系,转染hsamiR-133b至Hep-2细胞并通过荧光显微镜检测转染效率.针对过表达miR-133b组及NC组Hep-2细胞,MTT法检测细胞增殖,流式检测细胞周期及凋亡,Tanswell法检测细胞侵袭,生物信息学预测并通过双荧光素酶载体法验证miR-133b靶基因并通过Western blot检测靶基因GSTP1蛋白表达.结果 获得5个喉癌表达上调miRNA,8个喉癌表达下调miRNAs,选择miR-133b进行功能研究.喉癌中miR-133b表达显著下调约4.1倍,且miR-133b的表达水平与肿瘤局部浸润深度、是否存在区域淋巴结转移、患者临床分期以及组织学分级呈负相关.转染hsa-miR-133b mimic至喉癌Hep-2细胞,转染效率超过80％,实现细胞水平过表达miR-133b.过表达miR-133b可以显著抑制喉癌细胞的增殖、影响喉癌细胞周期、促进喉癌细胞凋亡以及抑制喉癌细胞迁移.miR-133b与GSTP1存在靶向调控关系,过表达miR-133b可以明显下调GSTP1蛋白表达量.结论 miR-133b通过GSTP1调控喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、侵袭行为且具有一定的临床意义,为将来基于miR-133b进行喉癌临床诊断、预后判断及分子靶向治疗提供新的思路和理论依据.
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关键词
miR-133bGSTP1喉癌Hep-2细胞增殖凋亡侵袭miR-133bGSTP1laryngeal cancer Hep-2 cellsproliferationapoptosismigration
分类号
R739.65（耳鼻咽喉肿瘤）
栏目名称
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.01.018
发布时间
2019-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81502493）
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