换一批
换一批不同载体微球在p300与RORγt Co-IP实验效率的比较
Comparison of experimental efficiency of different carrier microbeads in p300 and RORγt Co-IP
摘要目的 在免疫共沉淀(Co-IP)过程中使用Protein A/G-琼脂糖珠捕获蛋白和使用Protein A/G-磁珠捕获蛋白的比较分析.方法 先通过共转染Flag-p300和Myc-RORγt质粒入人胚肾细胞系293T (HEK293T)进行过表达,裂解细胞制备蛋白,分别使用Protein A/G-琼脂糖珠捕获蛋白和使用Protein A/G-磁珠捕获蛋白进行Co-IP;再通过分离人脐血单个核细胞诱导分化人辅助性T细胞17(Th17)进行Co-IP比较分析;通过CCK8实验排除转染试剂等对细胞活性毒性.结果 过表达的HEK293T细胞和诱导分化的Th17细胞中均显示腺病毒E1A结合蛋白(p300)与维甲酸相关孤儿核受体(RORγt)在Co-IP过程中使用Protein A/G-磁珠捕获大分子的p300蛋白效果好于中分子的RORγt蛋白,使用ProteinA/G-琼脂糖珠捕获中分子的RORγt蛋白效果好于大分子的p300蛋白.结论 在Co-IP过程中使用Protein A/G-磁珠捕获大分子蛋白效果较好,使用Protein A/G-琼脂糖珠捕获中分子蛋白效果较好.
更多相关知识
- 浏览110
- 被引0
- 下载31
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
