换一批过表达环状RNA泛素连接酶E3(circHERC4/hsa_circ_0007113)抑制细胞衰老的研究
Over-expression of circRNA ubiquitin ligase E3 (circHERC4/hsa_circ_0007113)inhibits cell senescence
摘要目的 研究泛素连接酶E3的环状RNA(cir-cHERC4/hsa_circ_0007113)与人胚肺成纤维细胞(IMR-90)的衰老的关系.方法 从circBase数据库上获得环状RNA circHERC4的全基因序列,将其克隆到环状RNA表达载体pLC5-ciR中,体外构建重组体pLC5-ciR(+)hsa_circ_0007113,经PCR、酶切、测序等对重组质粒进行鉴定.利用脂质体2000转染试剂将重组质粒转染到HEK293T和IMR90细胞中,并利用RT-PCR检测正常细胞组、空载体组及重组载体组中环状RNA circHERC4的表达情况;SA-β-gal染色检测各组细胞衰老情况;CCK-8法检测各组细胞增殖情况.结果 测序正确,成功构建了环状RNA circHERC4的过表达载体,circHERC4可在HEK293T细胞中高效表达.与对照组相比,重组载体组的SA-β-gal染色阳性率降低(P<0.05),细胞增殖率升高(P<0.05).过表达circHERC4后能提高IMR90细胞的增殖,抑制细胞的衰老.结论 cir-cHERC4具有潜在的抗衰老作用,为深入研究circHERC4的功能奠定了基础.
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分类号
Q291（细胞分子生物学）
栏目名称
DOI
10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.07.016
发布时间
2022-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
江苏省高等学校自然科学研究重大项目（18KJA320014）
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