ADH1B基因甲基化对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

Methylationof alcohol dehydrogenase 1 B gene and its effects on cell proliferation and cell apoptosis of ovarian carcinoma cells

二维码有效期 120s

摘要目的探讨乙醇脱氢酶1B(ADH1B)基因甲基化对卵巢癌(OC)细胞增殖及凋亡的影响.方法生物信息学方法比较ADH1B在卵巢癌与正常卵巢上皮组织中表达情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测卵巢癌与正常卵巢组织中ADH1B相对表达量,对比两种研究结果的一致性.两株卵巢癌细胞OV2008及C13K经不同浓度甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dc)干预48 h,CCK-8法检测5-Aza-dc对两株细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡形态学改变;甲基化特异性PCR(MSP)、qRT-PCR及West-ern blot法分别检测药物作用前后两株细胞株中ADH1B甲基化状态、ADH1B在mRNA及蛋白水平表达.结果生物信息学分析及qRT-PCR结果均显示卵巢癌中ADH1B表达量明显均低于正常卵巢组织;中、高浓度5-Aza-dc作用48 h后,两株细胞增殖受到抑制(P<0.01);高浓度5-Aza-dc作用后,两株细胞均出现典型细胞凋亡形态学改变;ADH1B在两株细胞中均呈完全甲基化,高浓度5-Aza-dc处理后,ADH1B甲基化被部分逆转,两株细胞ADH1B mRNA和蛋白表达均增加(P<0.01).结论 5-Aza-dc可下调卵巢癌细胞中ADH1B启动子区甲基化水平,使ADH1B基因重新表达,从而抑制卵巢癌细胞增殖与促进细胞凋亡.