幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞m6A甲基化水平及相关酶表达的影响

Effects of Helicobacter pylori infection on m6 A methylation level and related enzymes expression in gastric epithelial cells

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摘要目的研究幽门螺杆菌(Hp)感染胃上皮细胞中N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平及相关酶 FTO、METTL3 和 YTH-DF2 的表达变化,并使用在线网站分析其在胃癌中的表达和临床意义.方法 Hp GZ7 菌株感染正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞 AGS,感染复数为 30 ∶ 1,24 h 后收集细胞总RNA和总蛋白,斑点杂交实验检测细胞总RNA 的m6A修饰水平,q-PCR和Western blot检测 FTO、METTL3 和 YTHDF2的mRNA和蛋白表达.GEPIA 网站分析 FTO、METTL3 和YTHDF2 在胃癌组织和正常组织中的表达差异及其在Stage分期中表达,Kaplan-Meier Plotter分析FTO、METTL3 和YTH-DF2 表达与预后的关系.结果与未感染组比较,Hp感染GES-1 和AGS细胞中总 RNA m6 A 修饰水平均明显降低,FTO的mRNA和蛋白表达水平增加,METTL3 和YTHDF2 的mRNA和蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).胃癌组织中FTO表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),YTHDF2 表达水平高于正常组织,METTL3 表达水平低于正常组织,差异无统计学意义.FTO和METTL3 表达较高的胃癌患者有较低的生存率,而YTHDF2 高表达患者有较高的生存率.FTO表达与患者的 Stage分期显著相关(P<0.05),而METTL3 与YTHDF2 表达与Stage分期无显著相关性.结论 Hp感染可引起细胞m6A水平及相关酶FTO、METTL3 和YTHDF2 表达改变,提示 m6A甲基化可能在Hp诱导胃癌发生发展中发挥作用.